2025-03-12 04:07:29
一、主要特點(diǎn):免提取與高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專為血液樣本設(shè)計(jì)的高效PCR預(yù)混液,能夠直接從全血或干血斑中擴(kuò)增DNA,無(wú)需進(jìn)行繁瑣的DNA提取和純化步驟。這種預(yù)混液含有高保真DNA聚合酶(如HemoTaq?或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase),這些酶經(jīng)過(guò)優(yōu)化,能夠耐受血液中的各種抑制劑,包括抗凝劑(如EDTA、肝素、檸檬酸鈉)和濾紙中的化學(xué)物質(zhì)。此外,該預(yù)混液還具備的模板兼容性,能夠從多種抗凝劑保存的血液樣本中直接擴(kuò)增DNA,適用于人類、小鼠等哺乳動(dòng)物的全血樣本。二、性能:高保真性與長(zhǎng)片段擴(kuò)增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的優(yōu)勢(shì)之一是其高保真性。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶,接近Pfu DNA聚合酶,能夠確保擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。這對(duì)于需要高精度的基因克隆和測(cè)序?qū)嶒?yàn)尤為重要。此外,該預(yù)混液能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)5kb甚至更長(zhǎng)的DNA片段,適用于多種復(fù)雜的基因組分析。例如,它可以輕松擴(kuò)增人類基因組中的長(zhǎng)片段,如IL-6基因的4882bp片段。研究表明,優(yōu)化后的Cas12a系統(tǒng)在多種細(xì)胞類型中表現(xiàn)出良好的編輯效率。Recombinant Biotinylated Human CD47 Protein,His-Avi Tag
robe qPCR Mix (2×, High ROX):高特異性與強(qiáng)校正能力的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, High ROX) 是一種為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,特別適用于需要高濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及高濃度ROX,能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異的基因定量檢測(cè)。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合抗體或化學(xué)修飾技術(shù),有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測(cè)靈敏度。高濃度ROX校正:含有高濃度ROX染料,適用于需要高濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7000、7900HT等。防污染系統(tǒng):部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止假陽(yáng)性??焖俜磻?yīng):支持快速qPCR程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),提高實(shí)驗(yàn)效率。操作簡(jiǎn)便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),只需加入引物、探針和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測(cè):快速檢測(cè)病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過(guò)探針?lè)▽?shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因。
T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因編輯中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在突變體檢測(cè)和基因編輯效率評(píng)估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具體應(yīng)用步驟和特點(diǎn):1.**基因編輯效率評(píng)估**:-T7EI用于評(píng)估CRISPR-Cas9在給定的導(dǎo)向RNA靶位點(diǎn)上對(duì)細(xì)胞群體進(jìn)行基因編輯的效率。-通過(guò)PCR擴(kuò)增圍繞CRISPR導(dǎo)向RNA靶位點(diǎn)的基因組DNA,如果CRISPR-Cas9介導(dǎo)的非同源末端連接(NHEJ)修復(fù)事件引入了突變,變性和退火將形成突變型和野生型PCR擴(kuò)增子的異源雙鏈DNA。2.**突變體檢測(cè)**:-如果CRISPR/Cas9編輯成功在DNA上引入突變,則可與野生型DNA片段退火產(chǎn)生異質(zhì)雙鏈DNA。T7EI可以識(shí)別該DNA上的不完全配對(duì)的DNA位點(diǎn)然后進(jìn)行雙鏈切割,通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳即可顯示酶切后的條帶,從而半定量判定基因編輯效果。-T7EI能識(shí)別長(zhǎng)度大于或等于2bp的插入、缺失或突變導(dǎo)致的錯(cuò)配DNA,不能識(shí)別1bp的插入、缺失或突變。3.**實(shí)驗(yàn)步驟**:-收集細(xì)胞并提取基因組DNA,然后使用PCR擴(kuò)增期望編輯的基因組區(qū)域。擴(kuò)增子的長(zhǎng)度建議為0.5-1kb。-對(duì)擴(kuò)增的DNA進(jìn)行變性和退火復(fù)性,以產(chǎn)生異質(zhì)雙鏈DNA。-使用T7EI酶處理退火后的DNA產(chǎn)物,在37℃孵育15分鐘。
Ultra-Long DNA Polymerase 是一種專為超長(zhǎng)片段擴(kuò)增設(shè)計(jì)的耐熱DNA聚合酶,具有鏈延伸能力和高保真性,能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)數(shù)十千堿基(kb)的DNA片段。這種聚合酶在基因組學(xué)研究中具有重要意義,尤其是在復(fù)雜基因組的完整組裝和超長(zhǎng)測(cè)序領(lǐng)域。特點(diǎn)Ultra-Long DNA Polymerase 的重要優(yōu)勢(shì)在于其超長(zhǎng)擴(kuò)增能力。它能夠在單次反應(yīng)中合成超過(guò)100 kb的DNA片段,甚至在某些優(yōu)化條件下,比較大讀長(zhǎng)可達(dá)數(shù)百萬(wàn)堿基。這種能力使其在**基因組組裝中的缺口(gap)和實(shí)現(xiàn)端粒到端粒(T2T)基因組組裝方面表現(xiàn)出色。此外,Ultra-Long DNA Polymerase 具有高保真性,能夠降低擴(kuò)增過(guò)程中的錯(cuò)誤率,這對(duì)于需要高精度的基因組學(xué)研究至關(guān)重要。它還具備3'-5'外切酶活性,能夠進(jìn)一步提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性和可靠性。應(yīng)用Ultra-Long DNA Polymerase 在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大潛力。例如,在植物基因組學(xué)中,它被用于優(yōu)化超長(zhǎng)DNA片段的提取和擴(kuò)增,成功實(shí)現(xiàn)了多個(gè)植物物種的高質(zhì)量T2T基因組組裝。通過(guò)結(jié)合牛津納米孔(Oxford Nanopore)測(cè)序技術(shù),Ultra-Long DNA Polymerase 能夠生成超長(zhǎng)讀長(zhǎng)的測(cè)序數(shù)據(jù),明顯提高了基因組組裝的完整性和準(zhǔn)確性。
dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM):助力分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的高效防污染解決方案在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增和檢測(cè)的工具之一。然而,PCR產(chǎn)物的殘留污染可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果,嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)作為一種高效的防污染試劑,通過(guò)與尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)聯(lián)合使用,能夠有效解決這一問(wèn)題。產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與穩(wěn)定性dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)采用高純度的dATP、dCTP、dGTP和dUTP,純度≥99%,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。該產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存24個(gè)月,使用時(shí)需避免反復(fù)凍融。防污染機(jī)制該產(chǎn)品通過(guò)在PCR反應(yīng)中用dUTP替代dTTP,使擴(kuò)增產(chǎn)物中摻入dU堿基。隨后,UDG酶能夠特異性地降解含有dU的DNA產(chǎn)物,從而有效去除殘留的PCR產(chǎn)物污染。這種防污染系統(tǒng)特別適用于高通量PCR實(shí)驗(yàn)和需要嚴(yán)格控制假陽(yáng)性的應(yīng)用場(chǎng)景。兼容性與適用性dNTP/dUTPMixture適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和BstDNA聚合酶等,可用于PCR、real-timePCR、RT-PCR、引物延伸反應(yīng)以及cDNA合成等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。然而,需要注意的是,某些具有校正活性的酶可能不適用于該混合物,具體需參考酶的產(chǎn)品說(shuō)明書。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增突變檢測(cè)基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域。Recombinant Mouse CD27/NFRSF7 Protein,mFc Tag
在某些糖蛋白的純化方案中,利用 Endo H 對(duì)糖鏈的特異性水解作用,去除糖蛋白上的糖鏈。Recombinant Biotinylated Human CD47 Protein,His-Avi Tag
One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus):高效、特異且防污染的RNA定量檢測(cè)解決方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 是一種為RNA模板設(shè)計(jì)的一步法實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)試劑盒,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和UDG防污染系統(tǒng),能夠在同一反應(yīng)管中完成逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作簡(jiǎn)便且高效。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性:采用優(yōu)化的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合SYBR Green I染料,能夠高效檢測(cè)低豐度RNA模板,同時(shí)減少非特異性擴(kuò)增。UDG防污染系統(tǒng):含有dUTP和UDG酶,可在反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止氣溶膠污染。操作簡(jiǎn)便:逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。兼容性強(qiáng):適用于多種qPCR儀器,支持快速反應(yīng)程序。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病毒檢測(cè):適用于RNA病毒的快速檢測(cè),如流感病毒、病毒等。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測(cè)。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點(diǎn),成為分子生物學(xué)研究和臨床檢測(cè)中的重要工具,尤其適用于需要快速、準(zhǔn)確檢測(cè)RNA樣本的場(chǎng)景。Recombinant Biotinylated Human CD47 Protein,His-Avi Tag