2025-03-07 02:01:59
與BrdU方法相比,EdU檢測(cè)方法無(wú)需DNA變性,無(wú)需抗原修復(fù),無(wú)需抗原抗體反應(yīng),更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確,是細(xì)胞增殖檢測(cè)的比較好選擇。更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無(wú)需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無(wú)需過(guò)夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的基本結(jié)構(gòu)級(jí)應(yīng)用。上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家
EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。本試劑盒可以檢測(cè)到細(xì)胞或組織樣品中單個(gè)的增殖細(xì)胞,同時(shí)也可以對(duì)細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測(cè)。本試劑盒可以檢測(cè)培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測(cè)組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法上海正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)廠家。
以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測(cè)單細(xì)胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過(guò)免疫熒光檢測(cè),后者通過(guò)熒光顯微鏡檢測(cè)。優(yōu)點(diǎn)是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記,且可同時(shí)使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè),操作**簡(jiǎn)便。適用于貼壁或懸浮細(xì)胞,冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測(cè)法不同,EdU-Click檢測(cè),如EdU-Click594(BCK-EDU594)無(wú)需進(jìn)行DNA變性來(lái)檢測(cè)摻入的EdU,而是通過(guò)一次快速、高度特異性的點(diǎn)擊反應(yīng),將EdU高效地?fù)饺氲叫潞铣傻腄NA之中,通過(guò)EdU與不同熒光染料的特異性反應(yīng)檢測(cè)DNA復(fù)制活性,從而確地反映細(xì)胞的增殖情況。這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)方案,準(zhǔn)確且兼容各種抗體實(shí)驗(yàn)方案,整個(gè)實(shí)驗(yàn)可在30分鐘內(nèi)完成,在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面,堪比多重分析方法。
EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡(jiǎn)單易行?!奔?xì)胞增殖檢測(cè)方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測(cè)新合成的DNA,簡(jiǎn)單,快速,準(zhǔn)確。這種檢測(cè)方法非常快速,且只需簡(jiǎn)單的幾個(gè)步驟,因此也適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞的活力。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何發(fā)揮重要作用?上海東寰告訴您。
細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過(guò)量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)上海東寰告訴您使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的便捷性。上海品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家
EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家